摘要：目的構建載內皮抑素（Es）重組表達質粒的殼聚糖納米基因載體并評價其抑制內皮細胞增殖的活性。方法選用真核表達質粒pVAX1為重組載體，采用PCR及雙酶切法制備能夠表達TatPTD—Es融合蛋白的真核表達栽體pVAXI／TatPTD—Es；離子交聯法制備殼聚糖載基因納米粒，瓊脂糖凝膠電泳篩選處方，檢測納米粒的形態、Zeta電位及粒徑；采用最佳處方比例制備載重組質粒納米載體，轉染人臍靜脈內皮細胞HUVEC，采用ELISA法測定分泌型TatFFD—Es蛋白的表達量，CCK-8法測定對HUVEC的抑制作用，以上兩個實驗均以Lipofecta．min^TM2000為陽性對照。結果pVAX1／TatPTD—Es的真核表達載體構建成功，殼聚糖納米粒Zeta電位（14．3±1．6）mV，粒徑（145±12）nm，納米粒轉染HUVEC后細胞上清中TatPTD—Es的濃度為（182．5±16．3）ng／mL，殼聚糖基因載體轉柒HUVEC后對細胞有明顯的抑制作用，72h的抑制率達（53．4±5．4）％（Z=-2．611，P=0．008）。結論構建的殼聚糖納米基因載體能夠成功轉染HUVEC并能明顯地抑制內皮細胞的增殖。