摘要：目的通過指數富集的配體系統進化技術(SELEX)篩選特異性結合幽門螺桿菌(H.pylori)黏附蛋白A(HpaA)的核酸適配子,并鑒定其結合特性。方法構建pET28a/HpaA原核表達質粒并誘導表達純化重組HpaA蛋白;以重組HpaA蛋白為靶標利用SELEX技術篩選出能夠與HpaA具有高特異性、高親和力結合的核酸適配子。隨后利用篩選所得HpaA適配子通過體外實驗驗證與H.pylori菌體的結合以及對臨床胃黏膜切片中H.pylori的檢測效能。結果本研究培養并提取ATCC26695菌株基因組,通過PCR擴增HpaA部分基因長度約699 bp,并成功克隆構建了原核表達質粒pET28a/HpaA。經異丙基β-D-半乳糖苷(IPTG)誘導表達、純化獲得純度約98%的重組HpaA蛋白作為篩選靶標。利用SELEX技術通過10輪正向篩選和5輪的負向篩選,獲得6條與HpaA高親和力的適配子分別命名為HA1~HA6。其中適配子HA6具有較高的親和力和特異性,且適配子HA6核心序列在體外仍表現出與H.pylori菌體較高的結合力;利用羥基熒光素(FAM)標記的HA6適配子對166例H.pylori感染的患者胃黏膜中H.pylori進行檢測,檢出率為94.58%,高于同批次快速脲酶檢測法的檢出率(87.95%)。結論本研究篩選出的特異性結合H.pylori菌體表面HpaA的適配子,可能作為一種新的方法應用于胃黏膜組織中H.pylori的檢測。